簡(jiǎn)要描述:
硝酸還原酶(NR)測(cè)試盒是一類能催化亞硝酸鹽還原的酶,廣泛存在于微生物及植物體內(nèi),是自然界氮循環(huán)過程中的關(guān)鍵酶,可以將亞硝酸鹽降解為NO或NH3,從而減少環(huán)境中亞硝態(tài)氮的積累,降低因亞硝酸鹽累積而造成的對(duì)生物體的毒害作用。
更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:798
商品詳情:
硝酸還原酶(NR)測(cè)試盒測(cè)定意義
硝酸還原酶(NiR)是一類能催化亞硝酸鹽還原的酶,廣泛存在于微生物及植物體內(nèi),是自然界氮循環(huán)過程中的關(guān)鍵酶,可以將亞硝酸鹽降解為NO或NH3,從而減少環(huán)境中亞硝態(tài)氮的積累,降低因亞硝酸鹽累積而造成的對(duì)生物體的毒害作用。
貨號(hào) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 |
YSH3490 | 100管/48樣 | 微量法 |
YSH3490-1 | 50管/24樣 | 可見分光光度法 |
測(cè)定原理
亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO,使樣品中參與重氮化反應(yīng)生成紫紅色化合物的NO2—減少,即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)土壤中亞硝酸還原酶的活性。
需自備的儀器和用品
天平、研缽、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、水浴鍋、低溫離心機(jī)。
樣品中AA提?。?/span>
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
3.血清等液體:直接檢測(cè)。
計(jì)算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
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神經(jīng)源性分化蛋白4ELISA試劑盒 NEUROD4免費(fèi)代測(cè)試劑
神經(jīng)源性分化蛋白2ELISA試劑盒 NEUROD2免費(fèi)代測(cè)試劑
神經(jīng)源性分化蛋白1ELISA試劑盒 NEUROD1免費(fèi)代測(cè)試劑
神經(jīng)源素2ELISA試劑盒 NEUROG2免費(fèi)代測(cè)試劑
神經(jīng)源素1ELISA試劑盒 NEUROG1免費(fèi)代測(cè)試劑
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硝酸還原酶(NR)測(cè)試盒二磷核酮糖羧化酶(Rubisco)比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣
二磷核酮糖羧化酶(Rubisco)比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
二磷核酮糖羧化酶(Rubisco)比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法25管/24樣
3磷甘油醛脫氫酶(GAPDH)比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣
3磷甘油醛脫氫酶(GAPDH)比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
3磷甘油醛脫氫酶(GAPDH)比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法25管/24樣
果糖1,6二磷酶(FBP)/果糖1,6二磷酯酶比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣
果糖1,6二磷酶(FBP)/果糖1,6二磷酯酶比色法檢測(cè)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
磷丙糖異構(gòu)酶(TPI)比色法檢測(cè)試劑盒 微量法100管/96樣