血凝儀的使用,為臨床提供了血栓與止血的眾多參數(shù),促進了血栓與止血實驗診斷水平的提高。為保證給臨床診斷、治療、監(jiān)測病情及預(yù)后評估等提供zui為可靠、zui為準確的數(shù)據(jù)?,F(xiàn)就標本采集、制備、運輸、抗凝劑的選擇等注意事項即分析前質(zhì)量控制做一綜述。
1 標本的采集
1.1 防止組織損傷(外源因子進入) 采血應(yīng)“一針見血”以防止組織損傷和外源性凝血因子進入針管[1]。用注射器取血時,如果抽血過慢或不太順利,可能激活凝血系統(tǒng),實驗結(jié)果將會顯示凝血因子活性增高、血小板數(shù)假性降低等異常結(jié)果,采血用品推薦使用真空采血系統(tǒng)。
1.2 盡快送檢 一般血液采集時,進入容器到進行實驗所用時間越短,所被分析的凝血因子被保護得越好。
1.3 避免從輸液管取血 從輸液三通管取血的做法不可取。因為采取的樣品常含小凝血塊及污染的組織液,有時尚可混有經(jīng)此途徑給予的藥物,比如肝素返流在樣品中,導致凝血時間不應(yīng)有的延長。
1.4 取血因素 取血時的壓力,時間長短可影響局部血液的濃縮、纖溶活性(t-PA)、血小板釋放、某些凝血因子活性(Ⅷ因子)。
2 抗凝劑的選擇
2.1 推薦枸櫞酸鈉 鈣的快速螯合劑,能有效阻止Ⅴ和Ⅷ的降解,并可稀釋血漿和血液,但需要嚴格按1∶9比例抗凝。但若標本血的HCT異常增高或異常減低時,可用公式:抗凝劑用量=0.00185×血量(ML)×(100-患者HCT)矯正[2]。
2.2 緩沖抗凝劑 作用是維持血漿恒定的pH,防止易變因子失活,zui常用的緩沖劑是羥乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸。
2.3 抗凝劑聯(lián)合抗聚集劑 枸櫞酸鈉不能*抑制血小板活化,活化的血小板含釋放一些產(chǎn)物如:PF4、βTG、VWF和纖溶酶原激活抑制劑,所以這些因子的定量及纖溶系統(tǒng)的檢測選用抗凝劑聯(lián)合抗聚集劑,通常用CTAD液(枸櫞酸鈉0.11 mmol/L,茶堿15 mmol/L,腺苷3.7 mmol/L和潘生丁0.198 mmol/L)肝素治療監(jiān)測也需要CTAD抗凝,因活化血小板釋放PF4能中和肝素。
2.4 抗凝劑聯(lián)合抗纖溶劑 在溶栓治療監(jiān)測時,普通抗凝劑抗凝會使纖溶系統(tǒng)持續(xù)活化,而使纖維蛋白原及其降解產(chǎn)物的定量產(chǎn)生誤差,應(yīng)該使用有抗凝作用的抑肽酶可抑制纖溶活化,更能準確測定纖維蛋白原,但可引起TT延長。
3 試劑的選擇
根據(jù)儀器選擇合適的試劑,如光電檢測法凝血儀不宜選擇透光差的試劑;PT檢測時應(yīng)選擇ISI值低的試劑。
4 標本的運輸
在實驗室內(nèi)采血,或盡快送至檢測地點,嚴防劇烈振動,日光直射和異物落入;標本需室溫下運送,低溫會損傷血小板,至使因子Ⅵ、Ⅺ活化,使APTT和PT縮短。但是有些項目(如β血小板球蛋白、血小板因子Ⅳ和凝血因子等)需要在4 ℃下運送,以防止因子Ⅴ和Ⅲ降解;真空采血系統(tǒng)的真空管均帶有管塞,避免運送過程中標本的污染,保證醫(yī)護人員的安全。真空管的管塞可以防止因CO2散失而導致的pH值改變。綜上所述,血栓與止血實驗檢查的質(zhì)量控制對檢驗結(jié)果的準確可靠起著舉足輕重的作用。只有正確地掌握這些因素,才能得出的數(shù)據(jù),從而更好地服務(wù)于臨床。